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北京华新康信也有transnetyx实验试剂销售，对transnetyx组织常见问题做了解答如下：

家/Transnetyx 组织常见问题解答 | Transnetyx 组织

文化传媒

1.培养基 (Neurobasal ® /B27 ® /GlutaMAX™) 能稳定多久？

Transnetyx的培养基可在 4 o C 避光保存长达 6 个月。为防止氧化，可以将培养基分装成更小的体积并储存在 4 o C。

2. 我需要多久进行一次媒体交换？

Transnetyx每 3 到 4 天更换 1/2 培养基，但这部分取决于细胞密度。参见 INVITROGEN (LTI) FOCUS 16:6。如果细胞密度高于 500/mm 2，则每 2 天更换 1/2。

3. NbActiv1™ 和 NbActiv4® 有什么区别？

NbActiv4® 含有与 NbActiv1™ 相同的成分以及胆固醇、雌激素和肌酸。NbActiv4® 主要用作电生理学介质。  

4. 铺板海马培养物时，通常向 NbActiv1™ (Neurobasal ® /B27 ® /GlutaMAX™) 或 NbActiv4® (Neurobasal ® /B27 ® /GlutaMAX ) 添加 25uM 谷氨酸

™/胆固醇/雌激素/肌酸）直至培养第 4 天。谷氨酸的目的是什么？

它帮助海马神经元发芽并促进活力。在 DIV4 后，应使用不含谷氨酸的培养基进行半次培养基交换。

5.漏掉谷氨酸有问题吗？

在 DIV4 中，您的存活率将降低约 30%。

6. 如果我在 NbActiv1™ 中培养细胞，我可以将培养基更换为 NbActiv4® 吗？

是的，在培养过程中的任何时候，培养基都可以从 NbAcitv1™ 更改为 NbActiv4®。然而，事实并非如此。接种在 NbActiv4® 中的细胞不应更换为 NbActiv1™。

7.我需要哪些额外的用品来维持培养物？

每个订单包含足够的培养基以开始培养并维持 4 或 5 天。除此之外，您还需要更多培养基，Transnetyx可以通过 Invitrogen 单独购买完整的即用型配方。您还需要选择镀膜玻璃或塑料基材，Transnetyx推荐使用聚-D-赖氨酸作为基材。除此之外，您还需要解离溶液，Transnetyx推荐Transnetyx的 Papain and Hibernate® E-Ca 和火抛光移液器。Transnetyx将所有这些用品都包含在Transnetyx的完整培养套件中。

8.我应该在电镀培养基中添加抗生素/抗真菌剂吗？例如：pen/strep/fungizone 还是庆大霉素？

Transnetyx通常在不使用抗菌抗生素和抗真菌剂的情况下进行培养，并取得了很好的成功。这具有三个优点：

首先，当出现污染时，更容易识别污染源。其次，如果你使用抗生素，当你被感染时，就更难摆脱了。第三，抗生素已被证明可以激活神经元中的癫痫样爆发活动。使用抗生素是一种常见的做法，类型和浓度取决于最终用户。

Hibernate® 媒体

Hibernate ®、Neurobasal ® 和 B27 ® 仅用于研究目的，由 Invitrogen Corporation 制造。Hibernate ®、Neurobasal ® 和 B27 ® 是 Invitrogen Corporation 的商标。

1. Hibernate® Media 能稳定多久？

Transnetyx的 Hibernate 可在 4 o C 的黑暗中保存长达 1 年。为防止氧化，可以将培养基分装成更小的体积并储存在 4 o C。

2.您是否总是在 Hibernate® 中添加 B27® 和 GlutaMAX™，还是仅在 Hibernate® 中保持细胞存活？

几乎总是。请参见 Brewer 和 Price (1996) PM:8856709 的图 1 在 37 o C 环境 CO 2中，Neurobasal®/B27®/GlutaMAX™ 中的 LD50 为 24 小时，而在 Hibernate®/B27®/GlutaMAX® 中为大于 3 天。

3.Transnetyx可以提供定制的 Hibernate 配方吗？

是的，Transnetyx可以提供定制的 Hibernate 配方。

4. Hibernate 的其他用途包括：

转基因小鼠基因分型过程中的大脑储存。

将脑组织运送给合作者。

基质

1.我的神经元更多地以细胞簇或细胞团的形式生长，而不是孤立的。怎么了？

这意味着细胞与自身的粘附比与基底的粘附更紧密。最可能的问题是准备不足的底物。将您的方案与推荐的聚-D-赖氨酸制备和底物涂层进行比较。另一种可能性是电镀密度可能太高。

2.关于聚-L-赖氨酸与聚-D-赖氨酸，我假设使用聚-D-赖氨酸，因为如果它分解成赖氨酸，则d赖氨酸不能被细胞使用。这有什么道理吗？

这就是理论。在一些早期研究中（Brain Res. 494:65(1989)），Transnetyx发现差别不大。

3 . 一些研究人员使用聚乙烯亚胺 (PEI) 代替聚-D-赖氨酸 (PDL)。一个比另一个有优势吗？

PEI 比 PDL 便宜。Transnetyx在 PEI 上没有取得太大成功，但 Mark Mattson 在开始在 Neurobasal®/10% 血清中培养后一直使用它。报告表明神经元存活率或峰值率没有显着差异。

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