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HCP免疫测定

宿主细胞蛋白（HCP）构成了使用细胞培养技术生产的生物药物中与过程相关的主要杂质。HCPs是在重组生物药物表达过程中无意中产生的，如从宿主细胞中分泌，由于细胞应激以及在生物过程制造过程中细胞裂解引起的异常细胞运输所致。CHO细胞可产生70％以上的生物原料药，但 大肠杆菌， 巴斯德毕赤酵母， HEK 293细胞和HEK 293细胞也是常见的表达平台。无论使用哪种电池类型，HCP都是与工艺相关的主要杂质。由于宿主细胞蛋白（HCP）可能给患者带来风险并影响药物的功效和稳定性，因此必须设计生物制药纯化工艺以去除尽可能多的HCP。申请IND（研究用新药）时需要HCP清除，以降低临床试验的风险。

健壮且具有广泛反应性的宿主细胞蛋白（HCP）酶联免疫吸附测定（ELISA）是监测纯化过程一致性以及最终原料药纯度的关键工具，是HCP产品监测和释放测试的金标准方法。HCP ELISA可以在mg / ml水平的产品蛋白质存在的情况下测量ng / ml水平的HCP，不需要专门的技术来运行，并且很容易在整个组织中从过程开发到制造质量控制组转移。

“免疫测定方法依赖于能够尽可能广泛地识别进入下游纯化过程的HCP群体的抗体；因此，用多克隆抗体设计的夹心免疫测定是HCP监测和定量的主要手段。这种测定形式提供了高灵敏度，特异性，通量，自动化潜力，快速周转，定量结果和每次测定的低成本的组合，这是任何其他当前可用的测定技术所。” –  USP第1132章，3。HCP免疫测定方法

同时，HCP ELISA需要高水平的专业知识才能开发出具有广泛反应性的HCP抗体，然后将其转变为准确，灵敏，特异且稳定的分析方法。此外，ELISA无法提供有关最终药物中存在的单个HCP的信息，正在识别哪些HCP或测定是否具有广泛的反应性。

世界各地的监管机构已采取措施，确保发起人使用的HCP ELISA适合监测纯化过程的一致性和产品批次的释放。建议采用 正交方法， 例如抗体亲和提取（AAE™）免疫亲和色谱结合2D-PAGE和/或 质谱（MS） 方法来证明抗体对单个HCP的覆盖率，以支持HCP ELISA适用于目的。同样重要的是使分析的稀释度线性，准确性和精密度合格。

Cygnus提供 用于21种不同细胞系的通用 HCP ELISA试剂盒，*的  正交抗体覆盖分析服务， 通过AAE-MS™在过程样品和药物中进行 HCP鉴定，通用 化验鉴定服务 以及特定于过程的抗体和化验开发服务的专业知识 。

Cygnus的质量声誉已得到业界和全球监管机构的认可，并提供了多种通用的HCP ELISA试剂盒来支持上市的生物制剂。Cygnus的专有技术还被用于为许多全球生物制药公司开发100多种特定于过程的抗体和免疫测定法。

[1] Durocher，V.等。生物技术杂志。2017年

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