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北京华新康信生物科技有限公司代理Abbexa 品牌。
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abx060108 Human Complement C4 Protein abbexa
abx023337 Mouse Anti-Rabbit IgG (Fc) Antibody abbexa
abx520248 Human PYD And CARD Domain Containing (PYCARD) ELISA Kit abbexa
人源PYD和CARD结构域(PYCARD)ELISA试剂盒
货号: abx520248 货号: abx520248 货号: abx520248
包含CARD ELISA试剂盒的与人类细胞凋亡相关的斑点样蛋白质是针对包含CARD(PYCARD)的与人类凋亡相关的斑点样蛋白质的ELISA试剂盒。
目标 包含PYD和CARD域(PYCARD)
反应性 人的
经过测试的应用 酶联免疫吸附
建议稀释 佳稀释/浓度应由终用户确定。
存储 出厂时温度为4°C。收到后,按照试剂盒手册中的存放说明存放试剂盒。
有效期 该套件的有效期为6个月。
稳定性 试剂盒的稳定性取决于活性丧失的速率。在适当的存储条件下,有效期内的丢失率小于5%。为了大程度地降低性能波动,应严格控制操作程序和实验室条件。还强烈建议整个测试始终由同一用户执行。
UniProt主AC Q9ULZ3(UniProt, ExPASy)
UniProt次级AC Q96D12,Q9BSZ5,Q9HBD0,Q9NXJ8
UniProt条目名称 ASC_HUMAN
基因符号 皮卡
串 9606.ENSP00000247470
测试范围 0.156 ng / ml-10 ng / ml
标准格式 冻干
ELISA检测 比色法
ELISA类型 三明治
ELISA数据 定量的
样品类型 血清,血浆和其他生物液体。
测定原理 该试剂盒基于三明治酶联免疫吸附测定技术。将抗体预包被到96孔板上。将标准品,测试样品和生物素偶联试剂添加到孔中并孵育。然后加入结合了HRP的试剂,并孵育整个平板。在每个阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的结合物。TMB底物用于定量HRP酶促反应。添加TMB底物后,只有含有足够PYCARD的孔才会产生蓝色产物,然后在加入酸性终止溶液后变为黄色。黄色的强度与装在板上的PYCARD量成正比。在酶标仪中于450 nm处用分光光度法测量光密度(OD),由此可计算出PYCARD的浓度。
套件组件
预涂96孔微孔板
标准
标准稀释液
洗涤缓冲液
检测试剂A
检测试剂B
稀释剂A
稀释剂B
TMB基板
停止解决方案
封口机
必需但未提供的材料
37°C恒温箱
多通道和单通道移液器以及无菌移液器吸头
喷瓶或自动微孔板清洗机
1.5毫升管
蒸馏水
吸收性滤纸
100毫升和1升刻度量筒
酶标仪(波长:450 nm)
ELISA摇床
样品收集/准备
血清:应将样品收集到血清分离管中。将试管在4°C或室温下放置60分钟,使其垂直放置过夜,以凝结血清。以约1000×g的速度离心20分钟。立即分析血清或等分试样并储存在-20°C或-80°C下。
血浆:使用肝素或EDTA作为抗凝剂收集血浆。收集后30分钟内以1000×g离心15分钟。立即测定或等分试样并在-20°C或-80°C储存。避免溶血和高胆固醇样品。
组织匀浆:组织匀浆的制备取决于组织类型-这只是一个例子。用冰冷的PBS冲洗组织以去除多余的血液。匀浆前称重。将组织切碎并在冰上的PBS中用组织匀浆器匀浆,然后超声处理细胞悬液。将匀浆液以5000×g离心5分钟,然后收集上清液。立即测定或等分试样并在-20°C储存。
试剂准备
1)标准液:用推荐体积的标准稀释液配制标准液,制成标准溶液。然后按照协议中的说明,使用标准稀释剂缓冲液对标准溶液进行系列稀释。
2)洗涤缓冲液:按照协议中的说明,用蒸馏水稀释浓缩的洗涤缓冲液。
3)检测试剂的制备:计算所需工作溶液的总体积。用稀释剂A和稀释剂B分别以1:100稀释检测试剂A和检测试剂B。
测定步骤
1)设置标准品,测试样品和对照孔。
2)将100μl稀释的标准液分装到标准孔中。
3)将100μl标准稀释缓冲液等分到对照(零)孔中。
4)将100μl稀释的样品等分到样品孔中。在37°C下孵育1小时。
5)将100μl检测试剂A分装到每个孔中。在37°C下孵育1小时。
6)洗3次。
7)将100μl检测试剂B分装到每个孔中。在37°C下孵育30分钟。
8)洗5次。
9)将90μlTMB底物等分到每个孔中。在37°C下孵育10-20分钟。
10)分装50μl终止溶液。
11)在450 nm下测量OD。
协议
使用前,将试剂盒的组分和样品平衡室温(18-25°C)。建议为每个测试绘制标准曲线。
1.分别在预涂板上设置标准孔,测试样品孔和对照孔(零孔),然后记录其位置。建议测量每个标准品和样品少一式两份。
2.将100 µL的每种标准品,对照品和样品加到适当的孔中。用盖密封板并在37°C孵育1小时。
3.取下盖子并丢弃液体。
4.向每个孔中添加100μl检测试剂A工作溶液。用盖密封板并在37°C孵育1小时。
5.取下盖子并丢弃溶液。用1X Wash Buffer清洗板3次。
6.将100 µL检测试剂B工作溶液添加到每个孔中,密封并在37°C孵育30分钟。
7.弃去溶液并按照上一步中的说明用洗涤缓冲液将板洗涤5次。
8.将90μlTMB底物等分到每个孔中。用盖密封板并在37°C下孵育10-20分钟。避免暴露在光线下。孵育时间仅供参考,佳时间应由终用户确定。请勿超过30分钟。
9.向每个孔中添加50 µL终止溶液。立即在450 nm处读取。
结果计算 为了进行计算,请对每个参考标准品和每个样品的OD450重复读数取平均值,然后减去平均对照(零)OD450读数。可以将标准曲线绘制为每种参考标准溶液(Y)的相对OD450与每种标准溶液(X)的各自浓度的关系。可以从标准曲线内插样品的PYCARD浓度。
可用性 在5-12个工作日内发货。
注意 本产品仅供研究使用。
范围和灵敏度可能会发生变化。请与我们联系以获取的产品信息。为了获得准确的结果,必须将样品浓度稀释到试剂盒的中间范围。如果您需要特定范围,请提前与我们联系,或在订单注释中写下您的要求。
请注意,我们的ELISA和CLIA试剂盒经过优化,可检测天然样品,而不是重组蛋白。我们无法保证检测到重组蛋白,因为它们与天然蛋白可能具有不同的序列或三级结构。人类PYD和CARD域含有(PYCARD)ELISA试剂盒的研究文章
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