在环境科学与工业卫生领域,多环芳烃(PACs)作为一类广泛存在的污染物,其含量和毒性评估一直是研究的重点。Moltox硝化试验作为一种高效、灵敏的分析方法,为量化复杂混合物、燃烧产物及相关环境样品中的PACs提供了强有力的支持。
Moltox硝化试验的核心在于利用化学硝化反应将PACs转化为硝基衍生物,进而通过特定的生物测试方法——Ames试验,来评估这些硝基衍生物的致突变性。这一转化过程不仅提高了PACs的检测灵敏度,还赋予了该方法近乎绝对的化学选择性,确保只有PACs被衍生化并用于后续的毒性评估。
试验过程中,首先需要对样品进行化学硝酸处理,通常在80℃下与浓硝酸反应30分钟。这一步骤确保了即使对于耐衍生化的化合物也能发生反应,从而提高了方法的整体灵敏度。随后,硝化反应完成后的样品会被冷却至室温,并用二氯甲烷进行萃取。萃取后的残留物会被重组为二甲基亚砜(DMSO),用于后续的Ames测试。
Ames试验,特别是非活化试验版本,是Moltox硝化试验的重要组成部分。该版本的Ames试验使用了具有内源性硝基还原酶的TA98菌株,这使得硝基PACs能够在细菌内部被活化为致突变形式,而无需添加外源代谢混合物(S-9)。这一特性不仅提高了试验的灵敏度,还使得DNA加合物物种在细菌内部产生,避免了通过细胞壁运输的复杂过程。
Moltox硝化试验的终点是硝化致突变性指数(NMI),它反映了样品中硝基PACs的致突变效力。虽然NMI不能直接预测致癌潜力,但它可以作为比较各种复杂混合物相对PACs含量的一种有效手段。此外,由于改良Ames试验和硝化试验中测得的致突变性与PACs浓度成正比,因此可以在具有相似组成特征的样品之间建立相关曲线,进一步拓展了该方法的应用范围。
综上所述,Moltox硝化试验以其高灵敏度、高选择性和简便的操作流程,在环境污染物检测、工业卫生监测以及生物监测研究中发挥着重要作用。