Permagen试剂盒的组合物由一个引物对和一个探针组成:引物对由序列表中序列1和序列2所示的两条单链DNA分子组成:探针的序列为序列表中序列3。利用所提供的试剂盒对病毒进行检测,具有操作简便,快速、特异的优点。可快速筛查病毒,对口岸输入性疾病筛查具有重要意义,为防御疾病的传入做好技术支撑和战略储备,满足当前卫生检疫的需求。
Permagen试剂盒检测结果和判定标准:
试验结果成立的条件:阳性对照PCR反应产物电泳后在301bp的位置上出现特异性条带;阴性对照PCR产物电泳后没有条带,试验结果成立,否则结果不成立。
结果判断:在试验结果成立的前提下,如果样品PCR反应有特异性的条带,则样品为阳性;反之,为阴性。
Permagen试剂盒性能检测:
1、Permagen试剂盒的重复性检测对同一批提取的猴痘病毒阳性模板进行10次PCR扩增,观察试剂盒对同一批次阳性模板扩增的结果。对10批提取的猴痘病毒阳性模板进行PCR扩增,观察试剂盒对不同批次提取的阳性模板扩增的结果。
2、Permagen试剂盒的稳定性检测用配制好的检测试剂盒分装后保存在-20℃冰箱中,每隔7d对阳性模板进行PCR检测,连续检测6个月,观察试剂盒在-20℃保存的稳定性。用配制好的PCR反应混合物分装后分别保存在4℃冰箱或室温中,每隔12h对阳性模板进行PCR检测,连续检测4d,观察试剂盒在室温或4℃保存的稳定性。用配制好的PCR反应混合物分装后保存在-20℃冰箱后,分别冻融1~10次后,对阳性模板进行PCR检测,观察冻融次数对试剂盒的影响。