vmrd试剂盒-动物测试报告

发布时间： 2023-03-10　　点击次数： 404次

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马传染性贫血

EIAV 测试规则对于美国客户: VMRD，符合联邦法规，将只运送 EIAV 测试包到美国农业部批准的实验室。在美国，EIAV 检测试剂盒的销售和使用仅限于经州和联邦(USDA)动物卫生官员批准的实验室。美国国家兽医服务实验室将定期提供编码检查试验样本，以评估美国农业部批准的实验室的能力。有关成为 EIAV 许可的检测实验室的问题，请与美国农业部联系。

血清有完整的分析证书，其中包括 AGID 中的反应照片以及在 VMRD 实验室中运行的 ELISA 反应的光密度。这些参考血清是用于 EIA ELISA 检测的质量保证的参考样品。

VMRD 的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测马血清中的马传染性贫血病毒(EIAV)抗体。样品血清 EIAV 抗体与包被在塑料孔上的重组 EIAV p26抗原结合。非特异性抗体被洗去，平板结合的 EIAV 特异性抗体捕获 HRP- 重组 p26蛋白结合蛋白无 Fab 抗原结合位点。无界结合物被冲走，并且结合 HRP 标记抗原的存在是通过添加酶底物和随后的蓝色产品开发来检测的。停止溶液的加入减缓了酶的反应，并将产物的颜色从蓝色变为黄色。截止阳性对照提供了一个用于视觉读取结果的颜色参考，以及一个用于用微板吸光度光谱仪读取测定结果的光密度(OD)参考。黄色或 OD 等于或大于阳性对照表明样品血清中存在 EIAVp26抗体。颜色或 OD 低于阳性对照表明没有检测到 EIAV p26的抗体。 VMRD 的 EIAV ELISA 是快速和方便的-总孵育时间只有35分钟，没有样品稀释，只有两次洗涤-但它是高度特异和敏感的。 VMRD 的 ELISA 敏感性是相当的或优于其他美国农业部许可的 ELISA 滴定阳性样品和检测“弱样品"

工具包程序概述

1.将50μl 样品和对照转移到抗原涂覆板2的细胞内。在室温下培养10分钟3。洗一次，洗四次。加入50μl 抗原-过氧化物酶结合物5。在室温下培养10分钟6。洗四次，七次。加入50μl 基质溶液8。在室温下培养15分钟9。加入50μl 停止溶液10。读在450纳米或眼睛

如果样本产生的 OD 大于或等于阳性对照的平均值，则为阳性。如果样本产生的 OD 小于阳性对照的平均值，则为阴性。为使试验有效，正面控制的 OD 应大于或等于负面控制的 OD 的1.5倍。负面控制的 OD 应小于或等于0.15。为了测试是有效的时候阅读的眼睛，积极控制应该有可见的黄色和负面控制应该有没有或微弱的可见的颜色是小于积极控制。产生阳性检测结果的样品送交国家兽医服务实验室(NVSL)确认。

EIA 参考血清提供 EIA 阳性参考血清。这些马来源血清含有一定水平的抗体，在 VMRD 的 EIA ELISA 中呈强、中或弱阳性反应。每一小瓶血清都有一份完整的分析证书，其中包括在 AGID 中的反应照片以及在 VMRD 实验室中运行的 ELISA 反应的光密度。这些参考血清是用于 EIA ELISA 检测的质量保证的参考样品。

关于蓝舌病病毒蓝舌病是一种传染性的，非传染性的，节肢动物传播的，野生和家养反刍动物的病毒性疾病。在牛通常是亚临床感染，而在绵羊通常以急性卡他性粘膜炎症和冠状带充血为特征。骨骼和冠状动脉肌肉存在退行性改变，导致虚弱、恢复期延长和重大经济损失。蓝舌病毒(BTV)属于眼病毒属，呼肠孤病毒科。蓝舌病的实验室诊断主要是通过分离病毒来确定的。病毒在 Vero 或 BHK 21细胞中分离出来，其存在通过免疫荧光证实。诊断这种疾病的血清学方法有 AGID、 ELISA、 cELISA 和免疫荧光。阳性结果证实暴露于 BTV，但不一定是携带者状态。

VMRD 的蓝舌病毒 cELISA v2VMRD 的竞争性酶联免疫吸附测定(cELISA)检测反刍动物血清中的蓝舌病毒抗体。它已经被证明可以检测所有24种已知的蓝舌病毒血清型(BTV) ，而不能检测血清型1或2的兽疫出血症病毒(EHDV)抗体。与几项研究中的各种基准相比，该试剂盒显示出好的敏感性和特异性。VMRD 的新 BTV cELISA v2检测试剂盒提供了与原始版本(总孵育时间40分钟)相同的快速和方便的特性，以及包括蒸馏水清洗在内的新特性。美国农业部批准的18个月的保质期进一步提高了这种价格有竞争力的检测方法的经济性，也证明了试剂盒的稳定性。 VMRD 的蓝舌病毒 AGIDVMRD 的蓝舌病毒琼脂免疫扩散(AGID)试验检测到反刍动物血清中针对蓝舌病毒的沉淀抗体。还检测到流行性出血病病毒(EHDV)的抗体。如果检测结果呈阳性，则检测血清将形成一条与参考线融合的线，或者导致阳性参考线在检测血清附近向内偏移而不形成可见线。否定不会形成一条线，也不会造成正参考线的偏离。

CAEV 的研究在 VMRD 有着悠久的历史。VMRD 的主席斯科特 · 亚当斯是最初分离 CAEV 并在20世纪70年代末和80年代初表征该病及其控制的研究小组的成员。VMRD 竞争性酶联免疫吸附试验(cELISA)已被批准用于羊血清中检测山羊关节炎脑炎病毒(CAEV)抗体和绵羊进行性肺炎病毒(OPPV)抗体。我们的小型反刍动物慢病毒(SRLV) cELISA 测试了由山羊脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合衍生的专有异种单克隆抗体，其具有用于 cELISA 的优异特征。这种抗体与 HRP 结合，用于与血清抗体竞争与微滴度板结合的抗原。除了这里总结的验证研究之外，还证实了 VMRD 的 SRLV cELISA 检测试剂盒的*质量。1关于 CAE 和 OPPCAE 和 OPP (也称为 maedi-visna)分别是山羊和绵羊的持续慢病毒感染。分子分析表明，这些病毒非常相似，它们常被归类为小反刍动物慢病毒(SRLV)。多发性关节炎是 CAEV 感染的主要临床表现，而 OPP 典型表现为进行性肺炎引起的呼吸困难和消瘦。大多数感染 SRLV 的绵羊和山羊没有表现出临床疾病，但仍然是该病毒的持续携带者。病毒传播的主要方式是垂直通过牛奶和初乳。呼吸道分泌物和粪便也是感染性病毒的温床。在可靠的诊断工具的支持下，良好的管理实践是控制疾病传播的最佳手段。参考文献1 L.M. 的赫尔曼等人说: “用于检测血清抗体山羊关节炎-脑炎病毒的竞争抑制酶联免疫吸附试验: 成功除的诊断工具。"克林。Diagn.实验室。免疫系统。

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